非洲猪瘟病毒,检测样本:猪血液、组织、 口鼻(口腔液、 口鼻拭子)、粪 便及环境等样品
非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒
- 用途:科研检测(非临床诊断)
非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒
产品概述
非洲猪瘟(ASFV)是猪急性、热性、高度接触性传染病,家猪与野猪均易感,死亡率高。本试剂盒靶向ASFV高度保守区域,采用荧光PCR技术实现特异性核酸定性检测,适用于养殖场筛查、疾控监测、流行病学调查等场景,为疫病防控提供可靠分子生物学依据。
非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒
检测原理
基于TaqMan探针荧光定量PCR技术:通过逆转录将病毒RNA转化为cDNA,再利用特异性引物与FAM通道探针扩增靶序列;扩增中探针水解释放荧光信号,实时监测荧光变化,依据Ct值和扩增曲线完成定性判定 。
非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒
主要组成成分(50T/盒)
组分名称 规格
ASFV反应液 500μL×2管
酶液(含Taq酶) 50μL×1管
ASFV阳性对照 50μL×1管
阴性对照 250μL×1管
产品说明书 1份
非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒
适用样本类型
- 组织样本:脾脏、扁桃体、S脏、淋巴结
- 拭子样本:口鼻眼拭子
- 体液样本:全血、血清、血浆
储存条件及有效期
- 储存:-20℃±5℃避光密封,避免反复冻融
- 有效期:12个月(未开封)
- 运输:2-8℃冰袋运输,严禁反复冻融
适用仪器
ABI、Bio-Rad、Agilent MX3000P/3005P、Roche LightCycler、Eppendorf等系列荧光定量PCR仪
样本处理要求
1. 组织样本:取1g样品剪碎混匀,0.5g加1.5mL生理盐水研磨匀浆,8000rpm离心2min取上清
2. 全血样本:凝固后取100μL血清作为模板
3. 核酸提取:推荐使用离心柱法核酸提取试剂盒,严格按试剂盒说明操作,避免核酸降解与污染
检测步骤
1. 试剂配制:按样本数+2管对照(阴+阳)配制,每管加ASFV反应液20μL+酶液1μL,混匀后分装21μL/反应管
2. 加样:每管加入4μL样本核酸/阳性对照/阴性对照,盖管混匀后瞬时离心
3. 扩增程序:- 95℃ 10min(预变性)
- 40个循环:94℃ 15s → 55℃ 30s(采集FAM通道荧光)
4. 结果判定:- 阳性:Ct≤35且有典型S型扩增曲线
- 可疑:35<Ct<38,需复检
- 阴性:Ct>38或无Ct值
5. 质控要求:阴性质控Ct>38或无Ct,阳性质控Ct≤32且曲线呈指数增长,否则实验无效
产品性能优势
1. 高特异性:引物探针针对ASFV保守序列设计,与猪瘟病毒、蓝耳病等无交叉反应
2. 高灵敏度: 检测限≤10² copies/mL,适配早期低载量样本检测
3. 快速高效:全程≤1.5小时(含核酸提取),单批次可完成多份样本筛查
4. 操作简便:试剂预混,无需自行配制,降低操作误差
5. 结果直观:实时荧光判读,无需后续电泳,减少污染风险
注意事项
1. 严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增检测区),防止交叉污染
2. 耗材需无RNase处理,操作人员穿戴防护用品
3. 不同批号试剂不可混用,试剂需在有效期内使用
4. 样本采集、保存、运输需规范,避免反复冻融与降解
5. 实验废弃物需经消毒灭菌处理,遵循生物安全规范
适用场景
- 生猪养殖场、屠宰场日常筛查与疫情监测
- 猪b毒性**病例病原学鉴别诊断
- 动物疾控中心、兽医检测机构流行病学调查
- 生猪调运、引种前核酸检测
订购说明
- 起订量:电议
- 库存:电议
- 发货:冷链运输,确保试剂活性