公司动态
三种ELISA精简操作步骤
2026-05-21
三种ELISA精简操作步骤
奥瑞达生物
一、双抗体夹心法（测大分子抗原，最常用）
1. 试剂室温回温，稀释洗涤液、配制标准品梯度液
2. 每孔加标准品/样本50μL，37℃孵育30min
3. 弃液洗板5次拍干，加酶结合物100μL，同温孵育60min
4. 再次洗板5次，依次加显色A、B液各50μL，避光37℃显色15min
5. 加终止液50μL，450nm测OD，拟合曲线算浓度
奥瑞达生物
二、间接法（测抗体）
1. 包被抗原板平衡，稀释样本血清与阴阳对照
2. 每孔加稀释样本100μL，37℃孵育60min
3. 洗板5次，加入酶标二抗100μL，孵育60min
4. 洗板后加显色液避光显色，加终止液
5. 酶标仪读数，判定抗体阴阳性/滴度
奥瑞达生物
三、竞争法（测小分子物质）
1. 配制标准品、待测样本，备好酶标抗原
2. 样本/标准品各50μL入孔，再加等量酶标抗原混匀
3. 37℃孵育60min，充分竞争结合
4. 洗板5次，加显色液避光反应
5. 加终止液读数，浓度越高OD值越低，反向算结果
奥瑞达生物
通用统一要点
洗板统一：加满洗液静置30s，重复5次，彻底拍干
显色全程避光，终止后10分钟内完成读数
空白孔仅加底物+终止液，其余步骤不加样品与酶液